Реакции взаимодействия антиген — антител

Реакции между антигенами и антителами in vitro, имеющие диагностическое значе­ние, называли серологическими (от лат. sеrum — сыворотка), так как источником антител служила сыворотка крови. При появле­нии методов иммунохимического анализа серологические реакции стали одной из широкого набора реакций, выявляющих механизмы взаимодействия между антигенами и антителами. Если на раз­ных этапах развития иммунологии в качестве антител для постанов­ки серологических реакций использовали только сыворотку крови, теперь благодаря разнообразным методам выделяют из нее высоко­очищенные иммуноглобулины. для индикации и количественной оценки того или иного вещества антигенной природы предложены способы получения высокоспецифичных (моноспецифичных) ан­тител и высокочувствительные методы регистрации концентрации отдельных компонентов реакции антиген — антитело. Это стало возможным в связи с разработкой способов конъюгирования анти­генов и антител с флуоресцирующими красителями и ферментами, введения компонентов реакции антиген — антитело на различных типах носителей. Достижения современной иммунохимии позво­лили проводить реакции антиген — антитело на уровне, который вряд ли можно назвать серологическим, хотя источником антител продолжает оставаться сыворотка крови. Понятие «серологическая реакция» окончательно отпадает, когда речь заходит о взаимодей­ствии антигена с моноклональными антителами, получаемыми бла­годаря разработке гибридомной техники, и когда реакция анти­ген — антитело протекает при аллергии.

Антитела в зависимости от свойств антигена и условий взаимо­действия с ним обладают нейтрализующим, иммобилизирующим, коагулирующим (осаждающим) и лизирующим (растворяющим) действиями. Нейтрализующее действие проявляется в реакциях нейтрализации токсина антитоксином, иммобилизирующее — в иммобилизации некоторых микроорганизмов, коагулирующее — в реакциях агглютинации и преципитации, лизирующее — в реак­циях лизиса и связывания комплемента. Каждая из разновиднос­тей серологических реакций имеет свои варианты, а их постанов­ка — различные модификации, поэтому методические подходы к проведению реакций между антигеном и антителом довольно раз­нообразны.

Реакция нейтрализации (РН). В ходе реакции нейтрализации специфические антитела нейтрализуют вредное действие антигена, которое проявляется при попадании послед­него в организм. Если антигеном служит микробный экзотоксин (дифтерийный, столбнячный, ботулинический и др.), то специфи­ческие антитела нейтрализуют его. В организме происходит ней­трализация только свободного, не связавшегося с клетками токси­на. Обезвреживание токсина в ходе физико-химической реакции нейтрализации происходит за счет связывания его свободных ами­ногрупп, что приводит к потере токсичности. Если антигеном слу­жит вирусный материал, нейтрализующие антитела полностью подавляют специфическую активность вируса, выявляемую в раз­личных клеточных культурах, куриных эмбрионах и на подопыт­ных животных. Вирус перестает размножаться, теряет свою ин­фекционность.

Реакция агглютинации (РА). Различают прямую и непрямую, или пассивную, агглютинации. В прямой агглютина­ции в качестве антигена выступает сама микробная клетка или структурные компоненты ее поверхностной оболочки. Предел чувствительности реакции агглютинации микробов составляет 0,01 мкг азота белка антител в 1 мл.

Агглютинация обусловлена в большей степени особенностями строения клеточной оболочки и ее функциями, нежели свойства­ми агглютининов. Fab-фрагменты антител могут блокировать антигенные детерминанты, не приводя непосредственно к склеива­нию. Агглютинации способствует расположение антигенных ре­цепторов клеточной поверхности в виде скоплений. Если много­валентные агглютинины взаимодействуют одновременно с нес­колькими антигенными рецепторами, константа Ка повышается по сравнению с Ка для случаев соединения антитела с антигеном единичной связью.

При пассивной агглютинации растворимые антигены (белки, полисахариды и их комплексы микробного происхождения) со­единяются с нерастворимым носителем, выполняющим исключи­тельно индикаторную функцию. Носителями могут быть эритро­циты, частицы латекса, полиакриламида, бентонита и др. Связы­вание антигена с носителем происходит в результате адсорбции или химического взаимодействия. Микробные полисахариды, на­пример, адсорбируются на нативных эритроцитах без какой-либо их предварительной обработки. Различные белки (в том числе микробные фрагменты) возможно при соединить к эритроцитам, только обработав их различными химическими веществами, обла­дающими дубильным действием, — танином, хромахлоридом, фор­мальдегидом или бисдиазотированным бензидином. Такая об­работка предотвращает разрушение эритроцитов, которое может про изойти при непосредственном их контакте с антигеном. При условии, если антиген, связанный с носителем, соответствует ан­тителу, происходит агглютинация.

Реакция преципитации (РП). Реакция антиген­-антитело представлена преципитацией. Основана на осаждении антигена из раствора специфическими антителами. Комплекс ан­тиген — антитело выпадает в осадок только при определенных со­отношениях концентраций реагирующих молекул. Область этих соотношений, при которых в надосадочной жидкости после обра­зований преципитата не обнаруживаются ни свободные антигены, ни свободные антитела, называется зоной эквивалентности. Вне этой зоны, при избытке антител или антигена, феномен преципи­тации не происходит, так как образуется растворимый комплекс антиген — антитело. Реакция преципитации менее чувствительна, чем реакция агглютинации.

Существуют модификации реакции преципитации. Самый про­стой способ постановки —  кольцепреципитация, которую выполняют в пробирках путём наслоения на иммунную сыворотку раз­личных разведений прозрачного раствора антигена. На границе двух реагирующих систем через определенное время появляется опалесцирующее серо-белое кольцо преципитации. Именно та­ким образом при изучении стерильных фильтратов бульонных культур возбудителей холеры, брюшного тифа, чумы, сибирской язвы и соответствующих антисывороток в конце XIX века (1897) были обнаружены преципитины.

Реакция преципитации может быть поставлена в агаровом геле (иммунодиффузия по Ухтерлони). Принцип этого метода заклю­чается в следующем. Растворимые антигены и антитела вносят в лунки, вырезанные в геле на определенном расстоянии. Компо­ненты реакции диффундируют в слое агара навстречу друг другу, образуя в зоне контакта преципитат в виде мутной видимой линии преципитации.

Для более детальных иммунологических исследований приме­няют метод иммуноэлектрофореза, предложенный П. Грабаром и К. А. Уильямсом (1953). Вначале осуществляют электрофорети­ческое разделение антигена, представляющего собой зачастую смесь белковых или других молекул в забуференном агаровом геле. После разделения в канавку, которая идет в направлении миграции антигенных веществ, вносят преципитирующую сыво­ротку. Антиген и антисыворотка диффундируют в геле навстречу друг другу, и в месте их взаимодействия возникают дугообразные линии преципитации. По числу, положению и форме этих линий дают заключение о составе исходной смеси антигенов.

Реакция лизиса (РЛ). Лизирующее (растворяющее) действие антител наглядно проявляется в реакциях лизиса и свя­зывания комплемента. В основе реакций лизиса лежит взаимодей­ствие корпускулярных антигенов со специфическими антителами. Иммуноглобулины при содействии комплемента разрушают эри­троциты, ИЗ которых выходит гемоглобин и реагирующая смесь из мутной взвеси эритроцитов преобразуется в прозрачную красную жидкость, так называемую лаковую кровь. Реакция названа реак­цией гемолиза. Когда иммуноглобулины также при содействии комплемента разрушают оболочку бактериальной клетки, наблю­дается лизис бактерий — бактериолизис.

Реакция связывания комплемента  (РСК). Механизм действия наиболее сложный в сравнении с другими серологическими реакциями. В РСК участвуют две системы ан­тиген — антитело. Для визуальной регистрации связывания комплемента основной системой антиген — антитело в реакцию дополнительно вводят вторую, или индикаторную, систему, со­стоящую из взвеси эритроцитов и соответствующей антисыво­ротки (гемолитической сыворотки). Если основной комплекс антиген — антитело фиксировал в себе комплемент (в случае соответствия антигена антителу), то гемолиз отсутствует (положительная реакция). Если в основной системе антиген и антитело не соответствуют друг другу, то комплемент фиксируется на вто­ром индикаторном комплексе, вызывая гемолиз эритроцитов (ре­акция отрицательная). По чувствительности РСК примерно соот­ветствует реакции пассивной гемагглютинации.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ). В ос­нову иммунофлуоресцентного метода положено взаимодейст­вие антигена с антителом, при котором один из компонентов реакции (чаще антитело) обладает способностью к вторичной флуоресценции благодаря предварительному соединению с флуо­ресцентным красителем. Образовавшиеся таким образом им­мунные комплексы становятся хорошо видимыми, ярко светя­щимися структурами на темном фоне под флуоресцентным микроскопом. В качестве флуоресцентных красителей исполь­зуют флуоресцеин, изотиоцианат, родамин, В-изотиоцианат, лис­самин-родамин и другие, имеющие реакционно-способные груп­пы (сульфохлорид, изотиоцианат и др.), которые соединяются со свободными аминогруппами молекул антител, не теряя при обработке флуорохромами специфического связывания с соот­ветствующим антигеном.

Прямой инепрямой флуоресцентные методы. Прямой метод ос­нован на непосредственном специфическом соединении антигена с мечеными антителами. Непрямой метод — на поэтапном выяв­лении комплексов антиген — антитело с помощью флуоресцент­ных красителей. Первый этап заключается в образовании иммун­ных комплексов определенного антигена (например, бактериаль­ной клетки) со специфическими антителами (у-глобулинами) им­мунной сыворотки. Второй этап — в выявлении этого комплекса путем обработки его меченым анти-у-глобулином.

Обнаружение иммуноглобулинов иммунофлуоресцентным ме­тодом возможно, если антиген, использованный iп vitro для обра­зования антител, представляет собой растворимый белок. В этом случае он может быть конъюгирован с флуорохромом и В таком виде использоваться для обнаружения гомологичных антител.

Иммуноферментный анализ (ИФА). В основу метода положена конъюгация антитела или гаптена с Ферментом, которая не приводит к утрате антителом или гаптеном специфич­ности, а ферментом — каталитической активности. Однако в соста­ве комплекса антиген — антитело конъюгаты гаптен — фермент или антитело — фермент теряют свою каталитическую активность.

Соединение молекул антигена с ферментом осуществляется с помощью глутаральдегида — бифункционального реагента, взаи­модействующего с Е-аминогруппами белковых молекул. В каче­стве фермента успешно применяют в зависимости от модифика­ции метода либо пероксидазу, l3-галактозидазу, щелочную и кис­лую фосфатазы (реже ацетилхолин, глюкоамилазу), либо лизоцим, глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназу и малатдегидрогеназу. Используемый для маркировки антител фермент не должен присутство­вать в исследуемых клетках, содержащих антиген.

Иммуноферментные методы первоначально были разработаны для гистохимических исследований. Принцип иммуногистохими­ческого анализа с использованием ферментов заключается в сле­дующем. Антитела, маркированные ферментом, соединяются со специфическим антигеном, фиксированным на твердом носителе (полистироловая пластина или другие непористые полимеры), об­разуя невидимый комплекс. Выявление иммунных комплексов, содержащих фермент, проводится с помощью цветной реакции, происходящей при добавлении фермент-специфического субстра­та. Окрашенный комплекс антиген — антитело выявляется в све­товой или электронной микроскопии.

В дальнейшем методы иммуноферментного анализа стали при­менять для количественного определения антигенов и антител в биологических жидкостях. Были созданы гетерогенные (твердо­фазные) и гомогенные методы, принципиально отличающиеся способом разделения компонентов иммунохимической реакции. Гомогенный метод характеризуется протеканием реакции анти­ген — антитело в гомогенном растворе, и этап физического разде­ления реагентов и продуцентов реакции не обязателен. Твердо­фазные методы основаны на применении антител (или антиге­нов), иммобилизованных на нерастворимых носителях, гомоген­ные методы — на эффекте модуляции антителами активности фермента, связанного с антигеном. В основу гомогенных методов положен принцип конкурентного взаимодействия меченого и не­меченого гаптена с активными центрами антител. Чем больше свободного гаптена введено в реакцию до прибавления меченого гаптена, тем меньшее количество последнего будет связано с ан­тителами. Соответственно и ферментативная активность в раство­ре изменится незначительно. Наоборот, чем меньше свободного гаптена ввести в реакцию, тем большее количество ковалентного соединенного с ферментом гаптена уйдет в иммунный комплекс, а ферментативная активность в растворе существенно понизится.

Определение неизвестной концентрации гаптена в образце осу­ществляют по заранее выведенной калибровочной кривой, для пост­роения которой устанавливают зависимость активности фермента в данной системе от стандартных концентраций свободного гаптена.

В твердофазном иммуноферментном анализе наряду с конку­рентными методами распространены подходы, основанные на последовательном взаимодействии фиксированных на носителе иммуноглобулинов с антигеном (или наоборот), а затем с имму­ноферментным конъюгатом, представляющим собой меченные ферментом антитела против иммуноглобулинов (сэндвич-метод, от англ. sandwich — бутерброд).

Радиоиммунологический анализ (РИА). В ра­диоиммунологическом анализе специфичность реакции антиген- антитело сочетается с высокой чувствительностью, обеспечивае­мой применением радиоактивной метки, благодаря которой мож­но определить количество азота антител до 1х10-8 мг/мл. Для проведения анализа необходимо иметь антисыворотки и гомо­логичные антигены, маркированные каким-либо изотопом йода (125j, 131j), равно как и гаптены, маркированные 14С или 3Н. Чув­ствительность метода существенно возрастает при использовании высокоаффинных антител с низкой перекрестной реактивностью и антигенов с высокой удельной радиоактивностью. В основу ра­диоиммунологического анализа положен принцип конкурентного взаимодействия определяемого немеченого антигена и известного количества меченого антигена с активными центрами антител. При этом происходит вытеснение меченого антигена или гаптена из его комплекса с антителом вследствие последующего добавле­ния больших концентраций немеченого антигена или гаптена той же специфичности. Реакция (при высоком разведении ингредиен­тов) подчиняется закону действующих масс: происходящее вытес­нение пропорционально введенному количеству не меченого ан­тигена или гаптена. Конкуренцию между определяемым и мече­ным антигенами можно оценить количественно с помощью ра­диометрии, предварительно отделив образовавшиеся иммунные комплексы от несвязавшегося меченого антигена. Концентрацию определяемого антигена рассчитывают, исходя из сравнения соот­ношений свободного и связанного меченых реагентов с соответ­ствующим стандартом.

 

Возврат к списку статей

Поделиться:

Комментарии

Укажите имя

Напишите комментарий

Отправить комментарий

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-count
{
display: inline-block;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-count
{
position: relative;
top: -5px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-background,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-foreground
{
height: 22px;
width: 110px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-background
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-foreground
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stats
{
margin-top: 20px;
display: inline-block;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat
{
margin-bottom: 10px;
padding: 1px 5px;
cursor: pointer;
position: relative;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-only-rating
{
position: absolute;
left: 200px;
top: -22px;
background-color: #77bbee;
border: 1px solid #5599cc;
color: #fff;
width: 280px;
text-align: center;
font-size: 14px;
padding: 5px;
display: none;
transition: display 0.3s;
z-index: 1;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat:hover
{
padding: 0 4px;
border: 1px solid #ddd;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat.active
{
padding: 0 4px;
border: 1px solid #ccc;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat:hover .bmhouse-comments-stat-only-rating
{
display: block;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-title,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-count
{
display: inline-block;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-title
{
width: 100px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line
{
width: 200px;
height: 9px;
border: 1px solid #5599cc;
background-color: #f7f7f7;
border-radius: 3px;
margin-right: 20px;
box-sizing: border-box;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line-fill
{
background-color: #5599cc;
height: 7px;
border-radius: 3px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button
{
display: inline-block;
margin-left: 50px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 20px 40px;
border-radius: 6px;
position: relative;
bottom: 52px;
font-weight: bold;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button a:hover
{
background-color: #4488bb;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-block
{
margin-top: 30px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment.hidden
{
display: none;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left
{
display: inline-block;
width: 50px;
vertical-align: top;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left > div
{
width: 50px;
height: 50px;
background-color: #f7f7f7;
border: 2px solid #5599cc;
color: #5599cc;
text-align: center;
border-radius: 30px;
font-weight: bold;
overflow: hidden;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left .bmhouse-comment-userletter span
{
position: relative;
top: 14px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-right
{
display: inline-block;
width: 100%;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left + .bmhouse-comment-right
{
margin-left: 20px;
width: calc( 100% — 80px );
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-date
{
font-weight: bold;
display: inline-block;
color: #aaa;
font-size: 10px;
margin-left: 20px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-image img
{
max-width: 100px;
max-height: 100px;
cursor: pointer;
transition: max-width 0.5s, max-height 0.5s, width 0.5s, height 0.5s;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-image img.active
{
max-width: 700px;
max-height: 700px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating
{
margin-bottom: 15px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-background,
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-foreground
{
height: 22px;
width: 110px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-background
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-foreground
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form
{
margin-top: 20px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-title
{
margin-bottom: 30px;
font-size: 20px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item
{
margin-bottom: 20px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > label
{
width: 120px;
display: inline-block;
vertical-align: top;
margin-top: 8px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > input,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > textarea
{
width: 275px;
padding: 5px 10px;
border-radius: 8px;
resize: none;
border: 1px solid #5599cc;
font-size: 14px;
font-family: Verdana;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > textarea
{
height: 100px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating
{
display: inline-block;
border: 1px solid #fff;
border-radius: 8px;
padding: 2px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating-star
{
display: inline-block;
height: 22px;
width: 22px;
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
cursor: pointer;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating-star.bmhouse-comments-form-rating-star-hover
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button
{
margin-left: 0;
margin-top: 20px;
margin-bottom: 5px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button a
{
bottom: 0;
display: block;
}

#hidden-frame
{
width: 0;
height: 0;
display: none;
}

#bmhouse-comments-show-more-comments
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 10px 10px;
border-radius: 4px;
position: relative;
margin-bottom: 30px;
display: inline-block;
}

#bmhouse-comments-show-more-comments:hover
{
background-color: #4488bb;
}

.bmhouse-comment-voting
{
margin-top: 20px;
}

.bmhouse-comment-voting a
{
text-decoration: none;
color: #333;
display: inline-block;
padding: 0 5px;
line-height: 30px;
box-sizing: border-box;
}

.bmhouse-comment-voting a:first-child
{
margin-right: 10px;
}

.bmhouse-comment-voting a span
{
display: inline-block;
margin-right: 4px;
}

.bmhouse-comment-vote-up
{
border: 1px solid #afd6af;
}

.bmhouse-comment-vote-up:hover
{
background-color: #cff6cf;
}

.bmhouse-comment-vote-down
{
border: 1px solid #d8b9b9;
}

.bmhouse-comment-vote-down:hover
{
background-color: #f8d9d9;
}

.bmhouse-comment-vote-up.disabled,
.bmhouse-comment-vote-down.disabled
{
border: 1px solid #ccc;
background-color: #ddd;
}

.bmhouse-comment-answer
{
background-color: #e3e7f5;
margin-top: 20px;
padding: 10px 20px;
}

.bmhouse-comment-moderation
{
margin-top: 20px;
color: red;
}

.bmhouse-comment-moderation a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 5px 15px 7px;
border-radius: 6px;
margin-left: 20px;
}

.bmhouse-comment-moderation a[data-action=»DELETE»]
{
background-color: #ff0000;
}

.bmhouse-comment-moderation a:hover
{
background-color: #4488bb;
}

.bmhouse-comment-moderation a[data-action=»DELETE»]:hover
{
background-color: #ee0000;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add
{
margin-top: 30px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add textarea
{
height: 100px;
min-height: 100px;
background-color: #f8f8f8;
font-size: 14px;
font-family: Verdana;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 5px 15px 7px;
border-radius: 6px;
display: inline-block;
margin-top: 5px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add a:hover
{
background-color: #4488bb;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-text p
{
margin-top: 10px;
margin-bottom: 0;
font-style: italic;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comment-text p:first-child
{
margin-top: 20px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort
{
margin: 10px 0 20px;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort a
{
display: inline-block;
margin-left: 10px;
text-decoration: none;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort a.bmhouse-comments-sort-active
{
font-weight: bold;
color: #000;
cursor: default;
}

#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image
{
position: relative;
}

#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image:after
{
content: ‘Выбрать файл’;
position: absolute;
top: 0;
left: 0;
width: 100%;
height: 100%;
background-color: #5599cc;
color: #fff;
line-height: 30px;
text-align: center;
cursor: pointer;
}

#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image:hover:after
{
background-color: #4488bb;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-image-container
{
position: relative;
display: inline-block;
}

#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-image-container:after
{
content: »;
position: absolute;
right: 10px;
top: 10px;
width: 20px;
height: 20px;
background: url(‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/image_remove.png’) 50% 50% / contain no-repeat;
cursor: pointer;
}

@media screen and (max-width: 700px)
{
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stats
{
display: block;
margin-bottom: 100px;
}
}

@media screen and (max-width: 427px)
{
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button
{
margin-left: 0;
}
}

Разделы

• Все статьи
• Разведение свиней
• Ветеринария свиней
• Кормление свиней
• Содержание свиней

Продукция по теме

Ферран для поросят: двойное усвоение железа

Нита-Фарм

Источник