Идентификация нового В-клеточного эпитопа на шиповидном белке вируса эпидемической диареи свиней
Вирус эпидемической диареи свиней (ВЭДС) — высокопатогенный коронавирус, наносящий значительный ущерб свиноводству. Спайковый (S) белок ВЭДС, обеспечивающий проникновение вируса в клетку, является основной мишенью иммунного ответа. Выявление консервативных эпитопов в этом быстро эволюционирующем белке критически важно для разработки диагностических и профилактических средств.
В данном исследовании для иммунизации мышей использовали очищенные вирионы штамма ВЭДС G2c TRS2021. Было получено семь моноклональных антител (мАТ) к S-белку: 1F11, 2C4, 3D11, 3G7, 4G5, 8B2 и 8E4. Анализ показал, что только mAb 4G5 распознаёт линейный эпитоп, в то время как остальные шесть нацелены на конформационные эпитопы.
Для точного картирования эпитопа mAb 4G5 была проведена серия экспериментов с усечёнными вариантами S-белка, экспрессированными в клетках Vero. Методами иммунофлуоресценции и вестерн-блоттинга удалось локализовать целевой участок. Эпитоп был определён как линейная последовательность 1273NATYLNLTGE1282, расположенная в С-концевой области S2-субъединицы белка.
Анализ консервативности выявленного эпитопа на множестве циркулирующих штаммов ВЭДС (генотипы G1 и G2) показал его высокую сохранность. Моделирование пространственной структуры S-белка с помощью AlphaFold подтвердило поверхностную локализацию данного эпитопа, что объясняет его доступность для антител.
Оценка специфичности семи полученных mAb к различным штаммам ВЭДС выявила различия в широте реактивности. mAb 4G5, наряду с 1F11, 3D11 и 3G7, продемонстрировали широкий спектр, распознавая все протестированные штаммы, что подчёркивает консервативную природу их эпитопов.
Выводы:
1. С использованием очищенных вирионов ВЭДС в качестве иммуногена успешно получено семь новых моноклональных антител к S-белку.
2. Идентифицирован новый линейный В-клеточный эпитоп 1273NATYLNLTGE1282, демонстрирующий высокую консервативность среди различных штаммов ВЭДС.
3. Выявление данного консервативного эпитопа вносит вклад в понимание антигенности S-белка ВЭДС и открывает перспективы для разработки серологических диагностических тестов и вакцин на основе эпитопов.
Основные методы: очистка вирионов градиентным центрифугированием, иммунизация мышей, гибридомная технология, непрямой иммунофлуоресцентный анализ, вестерн-блоттинг, экспрессия усечённых белков в эукариотических системах, анализ консервативности последовательностей.
Исследование:
Animal Diseases
Возврат к списку статей
Поделиться:
Комментарии
Укажите имя
Напишите комментарий
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-count
{
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-count
{
position: relative;
top: -5px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-background,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-foreground
{
height: 22px;
width: 110px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-background
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-foreground
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stats
{
margin-top: 20px;
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat
{
margin-bottom: 10px;
padding: 1px 5px;
cursor: pointer;
position: relative;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-only-rating
{
position: absolute;
left: 200px;
top: -22px;
background-color: #77bbee;
border: 1px solid #5599cc;
color: #fff;
width: 280px;
text-align: center;
font-size: 14px;
padding: 5px;
display: none;
transition: display 0.3s;
z-index: 1;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat:hover
{
padding: 0 4px;
border: 1px solid #ddd;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat.active
{
padding: 0 4px;
border: 1px solid #ccc;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat:hover .bmhouse-comments-stat-only-rating
{
display: block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-title,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-count
{
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-title
{
width: 100px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line
{
width: 200px;
height: 9px;
border: 1px solid #5599cc;
background-color: #f7f7f7;
border-radius: 3px;
margin-right: 20px;
box-sizing: border-box;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line-fill
{
background-color: #5599cc;
height: 7px;
border-radius: 3px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button
{
display: inline-block;
margin-left: 50px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 20px 40px;
border-radius: 6px;
position: relative;
bottom: 52px;
font-weight: bold;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button a:hover
{
background-color: #4488bb;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-block
{
margin-top: 30px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment.hidden
{
display: none;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left
{
display: inline-block;
width: 50px;
vertical-align: top;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left > div
{
width: 50px;
height: 50px;
background-color: #f7f7f7;
border: 2px solid #5599cc;
color: #5599cc;
text-align: center;
border-radius: 30px;
font-weight: bold;
overflow: hidden;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left .bmhouse-comment-userletter span
{
position: relative;
top: 14px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-right
{
display: inline-block;
width: 100%;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left + .bmhouse-comment-right
{
margin-left: 20px;
width: calc( 100% — 80px );
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-date
{
font-weight: bold;
display: inline-block;
color: #aaa;
font-size: 10px;
margin-left: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-image img
{
max-width: 100px;
max-height: 100px;
cursor: pointer;
transition: max-width 0.5s, max-height 0.5s, width 0.5s, height 0.5s;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-image img.active
{
max-width: 700px;
max-height: 700px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating
{
margin-bottom: 15px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-background,
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-foreground
{
height: 22px;
width: 110px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-background
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-foreground
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form
{
margin-top: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-title
{
margin-bottom: 30px;
font-size: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item
{
margin-bottom: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > label
{
width: 120px;
display: inline-block;
vertical-align: top;
margin-top: 8px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > input,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > textarea
{
width: 275px;
padding: 5px 10px;
border-radius: 8px;
resize: none;
border: 1px solid #5599cc;
font-size: 14px;
font-family: Verdana;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > textarea
{
height: 100px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating
{
display: inline-block;
border: 1px solid #fff;
border-radius: 8px;
padding: 2px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating-star
{
display: inline-block;
height: 22px;
width: 22px;
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
cursor: pointer;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating-star.bmhouse-comments-form-rating-star-hover
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button
{
margin-left: 0;
margin-top: 20px;
margin-bottom: 5px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button a
{
bottom: 0;
display: block;
}
#hidden-frame
{
width: 0;
height: 0;
display: none;
}
#bmhouse-comments-show-more-comments
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 10px 10px;
border-radius: 4px;
position: relative;
margin-bottom: 30px;
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments-show-more-comments:hover
{
background-color: #4488bb;
}
.bmhouse-comment-voting
{
margin-top: 20px;
}
.bmhouse-comment-voting a
{
text-decoration: none;
color: #333;
display: inline-block;
padding: 0 5px;
line-height: 30px;
box-sizing: border-box;
}
.bmhouse-comment-voting a:first-child
{
margin-right: 10px;
}
.bmhouse-comment-voting a span
{
display: inline-block;
margin-right: 4px;
}
.bmhouse-comment-vote-up
{
border: 1px solid #afd6af;
}
.bmhouse-comment-vote-up:hover
{
background-color: #cff6cf;
}
.bmhouse-comment-vote-down
{
border: 1px solid #d8b9b9;
}
.bmhouse-comment-vote-down:hover
{
background-color: #f8d9d9;
}
.bmhouse-comment-vote-up.disabled,
.bmhouse-comment-vote-down.disabled
{
border: 1px solid #ccc;
background-color: #ddd;
}
.bmhouse-comment-answer
{
background-color: #e3e7f5;
margin-top: 20px;
padding: 10px 20px;
}
.bmhouse-comment-moderation
{
margin-top: 20px;
color: red;
}
.bmhouse-comment-moderation a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 5px 15px 7px;
border-radius: 6px;
margin-left: 20px;
}
.bmhouse-comment-moderation a[data-action=»DELETE»]
{
background-color: #ff0000;
}
.bmhouse-comment-moderation a:hover
{
background-color: #4488bb;
}
.bmhouse-comment-moderation a[data-action=»DELETE»]:hover
{
background-color: #ee0000;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add
{
margin-top: 30px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add textarea
{
height: 100px;
min-height: 100px;
background-color: #f8f8f8;
font-size: 14px;
font-family: Verdana;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 5px 15px 7px;
border-radius: 6px;
display: inline-block;
margin-top: 5px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add a:hover
{
background-color: #4488bb;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-text p
{
margin-top: 10px;
margin-bottom: 0;
font-style: italic;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-text p:first-child
{
margin-top: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort
{
margin: 10px 0 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort a
{
display: inline-block;
margin-left: 10px;
text-decoration: none;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort a.bmhouse-comments-sort-active
{
font-weight: bold;
color: #000;
cursor: default;
}
#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image
{
position: relative;
}
#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image:after
{
content: ‘Выбрать файл’;
position: absolute;
top: 0;
left: 0;
width: 100%;
height: 100%;
background-color: #5599cc;
color: #fff;
line-height: 30px;
text-align: center;
cursor: pointer;
}
#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image:hover:after
{
background-color: #4488bb;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-image-container
{
position: relative;
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-image-container:after
{
content: »;
position: absolute;
right: 10px;
top: 10px;
width: 20px;
height: 20px;
background: url(‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/image_remove.png’) 50% 50% / contain no-repeat;
cursor: pointer;
}
@media screen and (max-width: 700px)
{
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stats
{
display: block;
margin-bottom: 100px;
}
}
@media screen and (max-width: 427px)
{
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button
{
margin-left: 0;
}
}
Разделы
- Все статьи
- Разведение свиней
- Ветеринария свиней
- Кормление свиней
- Содержание свиней
Продукция по теме
Цефтонит для свиней: лечение маститов и инфекций
Нита-Фарм