Изменения в составе слюны и сыворотки крови домашних свиней и кабанов, экспериментально заражённых вирусом африканской чумы свиней
Африканская чума свиней (АЧС) представляет собой высококонтагиозную вирусную инфекцию, наносящую значительный экономический ущерб свиноводству и угрожающую популяциям диких кабанов. Заболевание характеризуется разнообразными клиническими признаками — от острого геморрагического синдрома с летальностью до 100% до хронических и субклинических форм, что осложняет диагностику. В условиях отсутствия вакцины и лечения, ключевую роль играют ранняя диагностика, мониторинг и понимание патогенеза. Традиционно исследования сосредоточены на сывороточных биомаркерах, однако забор крови является стрессовой процедурой для животных и требует специальных навыков. В этом контексте слюна, как неинвазивная биожидкость, представляет собой перспективную альтернативу для мониторинга состояния здоровья.
Целью данного исследования была комплексная оценка динамики широкого спектра биомаркеров стресса, воспаления, иммунного ответа, окислительного статуса и повреждения тканей в слюне и сыворотке крови домашних свиней (ДС) и диких кабанов (ДК) на экспериментальной модели острой формы АЧС, вызванной вирусом генотипа II.
Материалы и методы
Эксперимент проводился на семи домашних свиньях (порода дамасская) и семи диких кабанах (примерно пятимесячного возраста). Все животные были интраназально инокулированы вирусом АЧС (штамм «Пренцлау 2022», генотип II, линия III) в дозе 10^4 ГАЕ50/мл. Ежедневно регистрировались клинические признаки (активность, состояние кожи, дыхание, прием корма и др.) и ректальная температура (только у ДС). Образцы слюны (с использованием полипропиленовых губок) и сыворотки крови отбирались до заражения (0-й день), а также на 2-й и 7-й дни после заражения (дпз). Все образцы инактивировались 0.5% NP-40.
В образцах анализировалась панель биомаркеров:
— Стресс и благополучие: кортизол, окситоцин, α-амилаза (sAA).
— Воспаление и иммунный ответ: гаптоглобин (Hp), основной белок острой фазы свиней (ITIH4/Pig-MAP), общий белок, кальпротектин (S100A8/A9), S100A12, аденозиндезаминаза (ADA).
— Окислительный статус: FRAP (железовосстанавливающая антиоксидантная способность).
— Повреждение тканей: лактатдегидрогеназа (ЛДГ), креатинкиназа (КК).
Вирусная нагрузка оценивалась с помощью количественной ПЦР. Статистический анализ включал методы непараметрической статистики и корреляционный анализ (Пирсон) для связи биомаркеров с клиническими баллами (КБ), температурой и данными ПЦР (пороговый цикл, Ct).
Результаты
Клиническая картина и вирусная нагрузка. У ДС пирексия (>40°C) развивалась с 3-го дпз, а выраженные клинические признаки (вялость, анорексия, гиперемия кожи, гематомы) — с 5-го дпз. Все ДС были подвергнуты эвтаназии по гуманным показаниям между 8-м и 11-м дпз. У ДК выраженная лихорадка не регистрировалась, но с 5-7-го дпз развивались вялость, анорексия, диарея и геморрагические симптомы. Все ДК достигли гуманной конечной точки к 11-му дпз. Геном вируса АЧС в крови был впервые обнаружен у части животных на 2-й дпз, а к 4-му дпз — у всех. Пиковая вирусная нагрузка (наименьшие значения Ct) отмечалась на 7-й дпз у обоих видов.
Динамика биомаркеров.
У домашних свиней (ДС):
— В слюне на 7-й дпз достоверно повышались уровни Hp (в 2.7 раза), общего белка (в 1.6 раза), S100A8/A9 (в 4 раза), S100A12 (в 11 раз), ADA (в 9.3 раза) и ЛДГ (в 3.9 раза).
— В сыворотке на 7-й дпз значимо возрастали концентрации Hp (в 6.3 раза), ITIH4 (в 2.9 раза), ADA (в 2.9 раза) и ЛДГ (в 10-11 раз). Уровень креатинкиназы (КК) сыворотки был резко повышен (в 127 раз на 7-й дпз), в то время как активность амилазы снижалась.
У диких кабанов (ДК):
— В слюне наиболее выраженным изменением было экстремальное повышение активности α-амилазы на 7-й дпз (в 60 раз относительно фона).
— В сыворотке на 7-й дпз достоверно увеличивались концентрации Hp, ITIH4, ADA и активность ЛДГ (в 7 раз).
Корреляционный анализ. У ДС выявлены многочисленные значимые корреляции. Клинический балл сильно коррелировал с уровнем Hp в слюне, а также с Hp, ADA, ЛДГ и КК в сыворотке. Ректальная температура сильно коррелировала с ADA в слюне и ЛДГ/КК в сыворотке. Вирусная нагрузка (Ct) имела сильную обратную корреляцию с S100A12, ADA и ЛДГ в слюне, а также с амилазой, ADA и ЛДГ в сыворотке. У ДК корреляции были менее выражены: в сыворотке ЛДГ сильно коррелировала с клиническим баллом и вирусной нагрузкой.
Обсуждение
Исследование подтвердило развитие острого течения АЧС с характерной клиникой и высокой вирусемией у обоих видов. Ключевым выводом является видоспецифичность и матричная зависимость (слюна vs сыворотка) изменений биомаркерного профиля.
1. Воспалительный и иммунный ответ. Повышение белков острой фазы (Hp, ITIH4) в сыворотке обоих видов и в слюне ДС четко указывает на системную воспалительную реакцию. Значительный рост кальпротектинов (S100A8/A9, S100A12) и ADA преимущественно в слюне ДС может свидетельствовать об активном вовлечении клеточного иммунитета и нейтрофильной инфильтрации в слизистых оболочках ротовой полости или рефлекторном выбросе этих маркеров в слюну. Для ДК слюна оказалась менее информативна в отношении воспалительных маркеров, что, возможно, связано с большим стрессом от процедуры взятия проб у неодомашненных животных.
2. Стресс-ответ. Резкий подъем α-амилазы в слюне ДК на 7-й дпз (в 60 раз) является наиболее ярким видоспецифичным отличием. Это может отражать интенсивную активацию симпато-адреналовой системы у диких животных в ответ на тяжелое заболевание. У ДС подобного изменения не наблюдалось, что говорит о возможных различиях в физиологии стресса или его проявлении. Уровни кортизола и окситоцина в слюне значимо не менялись, что отличает АЧС от других стрессогенных состояний (транспортировка, боль) и требует дальнейшего изучения.
3. Повреждение тканей и цитолиз. Колоссальное увеличение активности ЛДГ и КК в сыворотке, особенно у ДС, является прямым следствием массивного повреждения и некроза тканей (печень, мышцы, эндотелий) при острой геморрагической форме АЧС. Повышение ЛДГ в слюне также указывает на возможное поступление фермента из кровотока или повреждение слизистых оболочек.
4. Потенциал слюны как диагностической матрицы. Результаты демонстрируют, что слюна у домашних свиней является высокочувствительной биожидкостью для выявления локального воспаления и иммунной активации (S100-белки, ADA), в то время как сыворотка лучше отражает системное воспаление и повреждение органов. Комбинация маркеров в слюне (например, ADA, S100A12, ЛДГ) показала сильную корреляцию с вирусной нагрузкой и клиническим статусом у ДС, что открывает перспективы для разработки неинвазивных экспресс-тестов для мониторинга заболевания в стадах.
Заключение
Экспериментальное заражение вирусом АЧС приводит к значительным и видоспецифичным изменениям профиля биомаркеров в слюне и сыворотке крови. У домашних свиней слюна является ценной матрицей для оценки воспалительного и иммунного ответа, коррелирующего с тяжестью инфекции. У диких кабанов наиболее выраженной реакцией в слюне был стресс-индуцированный выброс α-амилазы. Полученные данные расширяют понимание патофизиологии АЧС и подчеркивают потенциал сиалохимии (анализа слюны) для разработки неинвазивных инструментов мониторинга здоровья свиней и, возможно, раннего выявления заболеваний в условиях фермерских хозяйств. Для подтверждения этих результатов и оптимизации методов отбора слюны у диких кабанов необходимы дальнейшие исследования с большей выборкой.
Исследование:
Veterinary Research
Возврат к списку статей
Поделиться:
Комментарии
Укажите имя
Напишите комментарий
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-count
{
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-count
{
position: relative;
top: -5px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-background,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-foreground
{
height: 22px;
width: 110px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-background
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-rating-foreground
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stats
{
margin-top: 20px;
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat
{
margin-bottom: 10px;
padding: 1px 5px;
cursor: pointer;
position: relative;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-only-rating
{
position: absolute;
left: 200px;
top: -22px;
background-color: #77bbee;
border: 1px solid #5599cc;
color: #fff;
width: 280px;
text-align: center;
font-size: 14px;
padding: 5px;
display: none;
transition: display 0.3s;
z-index: 1;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat:hover
{
padding: 0 4px;
border: 1px solid #ddd;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat.active
{
padding: 0 4px;
border: 1px solid #ccc;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat:hover .bmhouse-comments-stat-only-rating
{
display: block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-title,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-count
{
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-title
{
width: 100px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line
{
width: 200px;
height: 9px;
border: 1px solid #5599cc;
background-color: #f7f7f7;
border-radius: 3px;
margin-right: 20px;
box-sizing: border-box;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stat-line-fill
{
background-color: #5599cc;
height: 7px;
border-radius: 3px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button
{
display: inline-block;
margin-left: 50px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 20px 40px;
border-radius: 6px;
position: relative;
bottom: 52px;
font-weight: bold;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button a:hover
{
background-color: #4488bb;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-block
{
margin-top: 30px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment.hidden
{
display: none;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left
{
display: inline-block;
width: 50px;
vertical-align: top;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left > div
{
width: 50px;
height: 50px;
background-color: #f7f7f7;
border: 2px solid #5599cc;
color: #5599cc;
text-align: center;
border-radius: 30px;
font-weight: bold;
overflow: hidden;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left .bmhouse-comment-userletter span
{
position: relative;
top: 14px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-right
{
display: inline-block;
width: 100%;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-left + .bmhouse-comment-right
{
margin-left: 20px;
width: calc( 100% — 80px );
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-date
{
font-weight: bold;
display: inline-block;
color: #aaa;
font-size: 10px;
margin-left: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-image img
{
max-width: 100px;
max-height: 100px;
cursor: pointer;
transition: max-width 0.5s, max-height 0.5s, width 0.5s, height 0.5s;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-image img.active
{
max-width: 700px;
max-height: 700px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating
{
margin-bottom: 15px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-background,
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-foreground
{
height: 22px;
width: 110px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-background
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-rating-foreground
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form
{
margin-top: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-title
{
margin-bottom: 30px;
font-size: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item
{
margin-bottom: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > label
{
width: 120px;
display: inline-block;
vertical-align: top;
margin-top: 8px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > input,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > textarea
{
width: 275px;
padding: 5px 10px;
border-radius: 8px;
resize: none;
border: 1px solid #5599cc;
font-size: 14px;
font-family: Verdana;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item > textarea
{
height: 100px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating
{
display: inline-block;
border: 1px solid #fff;
border-radius: 8px;
padding: 2px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating-star
{
display: inline-block;
height: 22px;
width: 22px;
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_empty.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
cursor: pointer;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-rating-star.bmhouse-comments-form-rating-star-hover
{
background: url( ‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/star_full.svg’ ) repeat-x;
background-size: 22px 22px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button
{
margin-left: 0;
margin-top: 20px;
margin-bottom: 5px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button a
{
bottom: 0;
display: block;
}
#hidden-frame
{
width: 0;
height: 0;
display: none;
}
#bmhouse-comments-show-more-comments
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 10px 10px;
border-radius: 4px;
position: relative;
margin-bottom: 30px;
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments-show-more-comments:hover
{
background-color: #4488bb;
}
.bmhouse-comment-voting
{
margin-top: 20px;
}
.bmhouse-comment-voting a
{
text-decoration: none;
color: #333;
display: inline-block;
padding: 0 5px;
line-height: 30px;
box-sizing: border-box;
}
.bmhouse-comment-voting a:first-child
{
margin-right: 10px;
}
.bmhouse-comment-voting a span
{
display: inline-block;
margin-right: 4px;
}
.bmhouse-comment-vote-up
{
border: 1px solid #afd6af;
}
.bmhouse-comment-vote-up:hover
{
background-color: #cff6cf;
}
.bmhouse-comment-vote-down
{
border: 1px solid #d8b9b9;
}
.bmhouse-comment-vote-down:hover
{
background-color: #f8d9d9;
}
.bmhouse-comment-vote-up.disabled,
.bmhouse-comment-vote-down.disabled
{
border: 1px solid #ccc;
background-color: #ddd;
}
.bmhouse-comment-answer
{
background-color: #e3e7f5;
margin-top: 20px;
padding: 10px 20px;
}
.bmhouse-comment-moderation
{
margin-top: 20px;
color: red;
}
.bmhouse-comment-moderation a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 5px 15px 7px;
border-radius: 6px;
margin-left: 20px;
}
.bmhouse-comment-moderation a[data-action=»DELETE»]
{
background-color: #ff0000;
}
.bmhouse-comment-moderation a:hover
{
background-color: #4488bb;
}
.bmhouse-comment-moderation a[data-action=»DELETE»]:hover
{
background-color: #ee0000;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add
{
margin-top: 30px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add textarea
{
height: 100px;
min-height: 100px;
background-color: #f8f8f8;
font-size: 14px;
font-family: Verdana;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add a
{
background-color: #5599cc;
color: #fff;
text-decoration: none;
padding: 5px 15px 7px;
border-radius: 6px;
display: inline-block;
margin-top: 5px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-answer-add a:hover
{
background-color: #4488bb;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-text p
{
margin-top: 10px;
margin-bottom: 0;
font-style: italic;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comment-text p:first-child
{
margin-top: 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort
{
margin: 10px 0 20px;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort a
{
display: inline-block;
margin-left: 10px;
text-decoration: none;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-sort a.bmhouse-comments-sort-active
{
font-weight: bold;
color: #000;
cursor: default;
}
#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image
{
position: relative;
}
#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image:after
{
content: ‘Выбрать файл’;
position: absolute;
top: 0;
left: 0;
width: 100%;
height: 100%;
background-color: #5599cc;
color: #fff;
line-height: 30px;
text-align: center;
cursor: pointer;
}
#bmhouse-comments input[type=»file»].bmhouse-comment-image:hover:after
{
background-color: #4488bb;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-image-container
{
position: relative;
display: inline-block;
}
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-image-container:after
{
content: »;
position: absolute;
right: 10px;
top: 10px;
width: 20px;
height: 20px;
background: url(‘/bitrix/components/bmhouse/comments/templates/.default/img/image_remove.png’) 50% 50% / contain no-repeat;
cursor: pointer;
}
@media screen and (max-width: 700px)
{
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-stats
{
display: block;
margin-bottom: 100px;
}
}
@media screen and (max-width: 427px)
{
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-button,
#bmhouse-comments .bmhouse-comments-form-item .bmhouse-comments-button
{
margin-left: 0;
}
}
Разделы
- Все статьи
- Разведение свиней
- Ветеринария свиней
- Кормление свиней
- Содержание свиней
Продукция по теме
Марбокс для лечение респираторных инфекций свиней и MMA
СЕВА Санте Анималь